Yes Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400261-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- YesO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Yes (h) e o Plasmídeo Double Nickase Yes (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para YES1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Yes Anticorpo (C-10): sc-46674
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Yes Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400261-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Yes Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400261-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
YES1 codifica a proteína Yes, uma tirosina quinase não recetora da família Src que retransmite sinais de recetores tirosina quinase, integrinas e recetores imunitários para efetores a jusante que controlam a proliferação, a adesão, a dinâmica do citoesqueleto e a sobrevivência celular. A Yes participa em vias como a sinalização de adesão focal, MAPK/ERK, PI3K–AKT e regulação de STAT, ligando estímulos extracelulares a programas transcricionais e metabólicos. A atividade aberrante de YES1 ou o ganho do número de cópias têm sido associados a alterações em redes de sinalização oncogénica, incluindo mudanças na migração celular e reconfiguração de quinases relacionada com resistência em múltiplos contextos tumorais. Como nó de sinalização, YES1 é frequentemente estudado pelo seu papel no crosstalk entre vias dependente de fosforilação e na regulação da transdução de sinal proximal à membrana.
Yes O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus YES1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de YES1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função YES1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com YES1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.