Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Yes Plasmide Double Nickase (h): sc-400261-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Yes Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Yes Double Nickase Plasmid (h) e il Yes Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira YES1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Yes Antibody (C-10): sc-46674
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Yes Plasmide Double Nickase (h) | sc-400261-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Yes Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400261-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
YES1 codifica Yes, una tirosin-chinasi non recettoriale della famiglia Src che trasduce segnali provenienti da recettori tirosin-chinasici, integrine e recettori immunitari verso effettori a valle che controllano proliferazione, adesione, dinamica del citoscheletro e sopravvivenza. Yes partecipa a vie quali la segnalazione delle adesioni focali, MAPK/ERK, PI3K–AKT e la regolazione di STAT, collegando stimoli extracellulari a programmi trascrizionali e metabolici. Un'attività aberrante di YES1 o un aumento del numero di copie è stato associato ad alterazioni delle reti di segnalazione oncogenica, inclusi cambiamenti nella migrazione cellulare e rimodellamenti di chinasi legati alla resistenza in molteplici contesti tumorali. In quanto hub di segnalazione, YES1 è spesso studiato per il suo ruolo nel crosstalk tra vie dipendente dalla fosforilazione e nella regolazione della trasduzione del segnale prossimale alla membrana.
Yes Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus YES1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di YES1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di YES1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con YES1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.