Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Waf1/Cip1/CDKN1A p21双切口酶质粒(m): sc-419607-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Waf1/Cip1/CDKN1A p21 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Waf1/Cip1/CDKN1A p21双切酶质粒（m）和Waf1/Cip1/CDKN1A p21双切酶质粒（m2）编码针对Cdkn1a的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Waf1/Cip1/CDKN1A p21: sc-6246，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Waf1/Cip1/CDKN1A p21双切口酶质粒(m) | sc-419607-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Waf1/Cip1/CDKN1A p21双切口酶质粒(m2) | sc-419607-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Cdkn1a 编码细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子 p21（Waf1/Cip1），它是 DNA 损伤与应激反应中的关键效应分子，通过抑制 CDK 活性来维持 G1/S 和 G2/M 细胞周期检查点。p21 受 p53 的转录调控，并整合来自 ATM/ATR 依赖性通路的信号，从而协调细胞周期停滞、DNA 修复以及情境依赖性的细胞衰老程序。通过调节 cyclin–CDK 复合物并与 PCNA 相互作用，p21 影响 DNA 复制动力学与基因组稳定性。Cdkn1a/p21 信号失调与肿瘤发生、组织衰老及炎症相关的组织重塑有关，因此在小鼠模型中关于增殖控制与应激适应的研究里，它常被视为一个重要的共同节点。
Waf1/Cip1/CDKN1A p21 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Cdkn1a 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Cdkn1a内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Cdkn1a的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Cdkn1a基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。