Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Vav Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423655
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Vav O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Vav, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Vav Anticorpo (D-7): sc-8039
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Vav Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423655 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Vav1 codifica Vav, um fator de troca de nucleotídeos de guanina específico de células hematopoéticas que ativa GTPases da família Rho, como Rac1 e Cdc42, para coordenar a remodelação do citoesqueleto e a propagação de sinais. Em células imunes de camundongo, Vav1 integra a sinalização a jusante de receptores de antígeno e de receptores Fc, conectando vias de tirosina quinases a programas transcricionais dependentes de MAPK, NF-κB e cálcio. Essas atividades modulam o desenvolvimento, a ativação e a migração de células T e influenciam funções efetoras induzidas por antígeno em diferentes linhagens linfoides. A sinalização desregulada de Vav1 tem sido associada a disfunção imune e a contextos de sinalização oncogênica em modelos de doenças hematológicas, tornando-o um nó importante para estudos mecanísticos de redes de sinalização em leucócitos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Vav (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Vav1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Vav1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Vav1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Vav.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Vav1 para a investigação da sinalização de Vav, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Vav1 críticos para a função Vav
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Vav1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Vav Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Vav Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Vav1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Vav Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Vav (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Vav1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Vav1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.