Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO VAT1 (h): sc-405997
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- VAT1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique VAT1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: VAT1 Antibody (E-7): sc-515705
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO VAT1 (h) | sc-405997 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
VAT1 (vesicle amine transport 1) code une protéine périphérique conservée de la membrane, enrichie dans les tissus neuronaux et sécrétoires, où elle s’associe aux vésicules synaptiques et aux vésicules à cœur dense. VAT1 a été impliquée dans la biogenèse et le trafic vésiculaires, en soutenant les processus d’exocytose et d’endocytose régulées qui façonnent la libération des neurotransmetteurs et des hormones. Par ces fonctions, VAT1 se rattache à des voies qui gouvernent la dynamique membranaire, des interactions protéiques associées au redox et les réponses au stress cellulaire dans des cellules hautement sécrétoires. Une expression altérée de VAT1 a été rapportée dans des études portant sur la neurodégénérescence, des phénotypes associés au cancer et des dérégulations métaboliques, ce qui en fait un nœud utile pour l’exploration mécanistique de la signalisation dépendante des vésicules.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO VAT1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène VAT1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du VAT1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert VAT1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine VAT1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en VAT1 pour l'étude de la signalisation de VAT1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de VAT1 essentiels à la fonction de VAT1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de VAT1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le VAT1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le VAT1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus VAT1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le VAT1 plasmide HDR (h) et le VAT1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie VAT1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles VAT1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.