非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
V-ATPase A1抗体（E-8）：sc-374475。Western blot分析V-ATPase A1在未处理的HeLa细胞裂解液（A）和化学处理的HeLa细胞裂解液（B）中的表达。检测试剂：m-IgGκ BP-HRP：sc-516102。β-肌动蛋白 (C4)：sc-47778 用作内参。检测试剂：m-IgG Fc BP-HRP：sc-525409。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
V-ATPase A1双切口酶质粒(h): sc-400975-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- V-ATPase A1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- V-ATPase A1双切酶质粒（h）和V-ATPase A1双切酶质粒（h2）编码针对ATP6V0A1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：V-ATPase A1: sc-374475，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
V-ATPase A1双切口酶质粒(h) | sc-400975-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
V-ATPase A1双切口酶质粒(h2) | sc-400975-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP6V0A1 编码液泡型 H\+-ATP 酶（V-ATPase）V0 结构域 a 亚基的 a1 同工型。V-ATPase 是由多亚基组成的质子泵，可使内体、溶酶体和分泌囊泡酸化。V-ATPase 驱动的细胞器酸化支持受体介导的内吞、溶酶体降解、自噬以及囊泡运输，并通过溶酶体功能影响 mTORC1 信号传导和细胞营养感知。通过调控腔内 pH，V-ATPase A1 也有助于蛋白质稳态（proteostasis）以及高效货物分选所需的膜融合事件。V-ATPase 活性与内体-溶酶体酸化的失调已与神经发育和神经退行性表型、突触功能改变，以及与疾病机制相关的更广泛细胞稳态缺陷有关。
V-ATPase A1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ATP6V0A1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ATP6V0A1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ATP6V0A1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ATP6V0A1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。