USP9X Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402285-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- USP9XO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase USP9X (h) e o Plasmídeo Double Nickase USP9X (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para USP9X. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
USP9X Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402285-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
USP9X Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402285-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
USP9X codifica uma grande protease específica de ubiquitina que remove ubiquitina de proteínas-substrato para regular a sua estabilidade, localização e o output de sinalização. A USP9X participa da proteostase dependente de ubiquitina e cruza-se com vias que controlam decisões de destino celular, progressão do ciclo celular, respostas a danos no DNA e sinalização de estresse, incluindo a modulação de redes relacionadas a quinases e apoptose. Por meio de sua atividade desubiquitinante, a USP9X influencia o tráfego endocítico e a renovação/degradação de proteínas de fatores regulatórios-chave, moldando assim programas transcricionais e a homeostase celular. A expressão ou atividade desregulada de USP9X tem sido associada a estados de sinalização alterados observados em transtornos do neurodesenvolvimento e em múltiplos contextos de câncer, tornando-a um alvo frequente em estudos mecanísticos da biologia da via da ubiquitina.
USP9X O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus USP9X em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de USP9X. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função USP9X. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com USP9X interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.