Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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USF-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423629
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- USF-2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico USF-2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: USF-2 Anticuerpo (5E9): sc-293443
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
USF-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423629 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El factor de transcripción aguas arriba 2 (USF-2), codificado por el gen murino *Usf2*, es un factor de transcripción de tipo hélice–bucle–hélice básica con cremallera de leucina que se une a motivos E-box para regular la actividad de promotores en redes génicas relacionadas con el metabolismo y la respuesta al estrés. USF-2 participa en el control transcripcional del metabolismo de la glucosa y los lípidos, la progresión del ciclo celular y programas de diferenciación, y puede modular el contexto de la cromatina mediante interacciones con co-reguladores. En sistemas murinos, la actividad alterada de USF-2 se ha asociado con una homeostasis metabólica desregulada y cambios en la señalización proliferativa, lo que respalda su relevancia para estudios de vías cardiometabólicas y asociadas al cáncer. Por ello, *Usf2* se investiga con frecuencia como un nodo que conecta el sensado de nutrientes, los circuitos transcripcionales y la expresión génica específica de tejido.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO USF-2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Usf2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Usf2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Usf2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína USF-2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Usf2 para la investigación de la señalización de USF-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Usf2 críticos para la función de USF-2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Usf2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido USF-2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido USF-2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Usf2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR USF-2 (m) y el plásmido HDR USF-2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Usf2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Usf2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.