UQCRC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423625

Visão geral

Uqcrc1 codifica a proteína central 1 da ubiquinol-citocromo c redutase (UQCRC1), um componente estrutural essencial do complexo III (citocromo bc1) da cadeia respiratória mitocondrial, que sustenta a transferência de elétrons do ubiquinol para o citocromo c e ajuda a manter a fosforilação oxidativa. Ao influenciar o potencial de membrana mitocondrial, a produção de ATP e a homeostase de espécies reativas de oxigênio, a UQCRC1 contribui para o metabolismo energético celular e para programas de sinalização redox. A perturbação da função do complexo III pode comprometer a adaptação metabólica e as respostas ao estresse, processos frequentemente investigados em modelos de neurodegeneração, fenótipos cardiometabólicos e biologia de doenças proliferativas. Como subunidade central do complexo III, a UQCRC1 é comumente estudada em vias que ligam a disfunção mitocondrial a alterações na sensibilidade à apoptose, na sinalização hipóxica e na bioenergética celular integrada.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO UQCRC1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Uqcrc1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Uqcrc1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Uqcrc1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína UQCRC1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Uqcrc1 para a investigação da sinalização de UQCRC1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Uqcrc1 críticos para a função UQCRC1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Uqcrc1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo UQCRC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo UQCRC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Uqcrc1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo UQCRC1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR UQCRC1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Uqcrc1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Uqcrc1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.