Plásmido Doble Nickase (h) UGT8: sc-405110-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)UGT8 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa UGT8 (h) y el plásmido de doble nickasa UGT8 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a UGT8. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) UGT8 | sc-405110-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) UGT8 | sc-405110-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El UGT8 humano codifica la UDP-galactosa:ceramida galactosiltransferasa, una enzima asociada al aparato de Golgi que cataliza la formación de galactosilceramida a partir de ceramida y UDP-galactosa, iniciando pasos clave en la biosíntesis de glicosfingolípidos. Esta actividad contribuye a la composición lipídica de la mielina, a la organización de microdominios de membrana y a procesos de señalización vinculados a la diferenciación de oligodendrocitos y a la homeostasis neural. La remodelación lipídica dependiente de UGT8 se interrelaciona con el metabolismo de la ceramida y con vías más amplias de esfingolípidos que regulan respuestas al estrés y decisiones sobre el destino celular. La alteración de la expresión de UGT8 o del equilibrio de galactosilceramida se ha asociado con contextos desmielinizantes y neurodegenerativos, y también se ha investigado en la reprogramación metabólica relacionada con el cáncer, lo que lo hace relevante para estudios mecanísticos centrados en vías.
UGT8 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus UGT8 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de UGT8. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de UGT8. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con UGT8 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.