TUTase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406803
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TUTase O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TUTase, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TUTase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406803 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O TUT1 humano codifica a uridililtransferase terminal 1 (TUTase), uma polimerase de RNA não canónica que catalisa a uridilação na extremidade 3′ de diversos substratos de RNA. Ao moldar a estrutura da extremidade 3′ do RNA, a TUTase contribui para a maturação e a renovação (turnover) do RNA, influenciando o metabolismo de snRNAs do spliceossoma e uma regulação génica pós-transcricional mais ampla. A uridilação dependente de TUT1 interage com vias de controlo de qualidade do RNA que regulam a estabilidade de pequenos RNAs e de populações selecionadas de mRNAs. Programas desregulados de “tailing” e degradação de RNA envolvendo TUT1 têm sido associados a estados de expressão génica alterados observados no cancro e noutras doenças com processamento de RNA perturbado.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TUTase (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TUT1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TUT1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TUT1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TUTase.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TUT1 para a investigação da sinalização de TUTase, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TUT1 críticos para a função TUTase
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TUT1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TUTase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TUTase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TUT1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TUTase Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TUTase (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TUT1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TUT1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.