Plásmido Doble Nickase (h) TSG-6: sc-400765-NIC

TNFAIP6 codifica el gen 6 estimulado por el factor de necrosis tumoral (TSG-6), una hialadherina secretada e inducida por citocinas inflamatorias que remodela la matriz extracelular mediante interacciones con el hialuronano y las cadenas pesadas del inter-α-inhibidor. Al catalizar y estabilizar complejos hialuronano–cadena pesada y modular la actividad de proteasas, TSG-6 influye en el tráfico de leucocitos, el edema tisular y la organización de la matriz asociada a la cicatrización. La expresión de TNFAIP6 se vincula a programas inflamatorios impulsados por NF-κB y a señales del microambiente que modelan la comunicación entre estroma e sistema inmunitario. La biología desregulada de TSG-6 se ha asociado con estados inflamatorios crónicos y con el estroma asociado a tumores, lo que la convierte en un nodo relevante para estudios mecanísticos del crosstalk entre matriz e inflamación.

TSG-6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TNFAIP6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TNFAIP6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TNFAIP6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TNFAIP6 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.