tsg 101慢病毒激活颗粒(m): sc-423524-LAC

小鼠 Tsg101 编码肿瘤易感基因 101（tsg101），是 ESCRT-I 复合体的核心组分之一。ESCRT-I 复合体协调内体分选、多泡体（MVB）生物发生以及对泛素化膜蛋白的溶酶体降解。通过 ESCRT 依赖的膜重塑，TSG101 还参与细胞质分裂末期的断裂分离（abscission），并促进细胞外囊泡的生成，从而与蛋白稳态维持及细胞间通讯相关。包括 TSG101 在内的 ESCRT 通路组分发生破坏或失调，已被认为与受体转运改变、应激反应及基因组稳定性变化有关，因此 Tsg101 是研究致癌信号动态以及与神经退行性疾病相关的蛋白毒性（proteotoxicity）的一个重要节点。在小鼠模型中，扰动 Tsg101 有助于探究内体-溶酶体通量如何影响生长因子受体周转及其下游通路，例如与 EGFR 相关的 MAPK 和 PI3K 信号传导。

tsg 101 慢病毒激活颗粒（m）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Tsg101 表达。

tsg 101 慢病毒激活颗粒（m）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在Tsg101转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性tsg 101表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 Tsg101 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。