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TRPC1双切口酶质粒(m) | sc-423512-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRPC1双切口酶质粒(m2) | sc-423512-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Trpc1 编码 TRPC1,这是一种非选择性阳离子通道的亚基,在多种小鼠细胞类型中参与受体操纵型(receptor-operated)和储存操纵型(store-operated)的 Ca2+ 内流。通过塑造细胞内 Ca2+ 动态,TRPC1 调控多种过程,包括膜兴奋性、细胞骨架重塑、细胞迁移,以及位于 PLC 偶联受体与 STIM–ORAI 信号通路下游的转录程序。TRPC1 的活性与 MAPK 和 NFAT 依赖性通路相互交叉,影响细胞分化与应激反应。TRPC1 介导的 Ca2+ 稳态失衡已在心血管重构、神经炎症和纤维化信号等实验模型中被提示相关性,支持其作为疾病相关通路机制研究的靶点。
TRPC1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Trpc1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Trpc1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Trpc1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Trpc1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。