Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) TREX-1: sc-403875-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TREX-1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TREX-1 (h) y el plásmido de doble nickasa TREX-1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TREX1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TREX-1 Anticuerpo (E-6): sc-271870
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TREX-1 | sc-403875-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TREX-1 | sc-403875-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TREX1 codifica TREX-1, la principal exonucleasa de ADN 3′→5′ en las células de mamífero, que degrada ADN citosólico de cadena sencilla y de doble cadena originado por retroelementos endógenos, estrés replicativo o intermediarios de reparación del ADN. Al limitar la acumulación anómala de ácidos nucleicos, TREX-1 ayuda a frenar la activación de la señalización cGAS–STING y de los programas de interferón tipo I aguas abajo, vinculando la vigilancia del genoma con la homeostasis de la inmunidad innata. La pérdida o disfunción de TREX-1 se asocia con señalización crónica de interferón y fenotipos de desregulación inmunitaria, y se estudia con frecuencia en el contexto de la genética de la inflamación y las vías de detección impulsadas por ácidos nucleicos. TREX-1 también se relaciona con procesos de replicación y reparación del ADN al procesar sustratos de ADN que, de otro modo, podrían desencadenar respuestas al daño.
TREX-1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TREX1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TREX1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TREX1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TREX1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.