Plasmide Double Nickase (h) TREM-1: sc-417344-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TREM-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TREM-1 Double Nickase (h) et le plasmide TREM-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TREM1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TREM-1 Antibody (2E2): sc-293450
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TREM-1 | sc-417344-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TREM-1 | sc-417344-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **TREM1** code le récepteur déclencheur exprimé sur les cellules myéloïdes 1 (TREM-1), un récepteur de la superfamille des immunoglobulines enrichi dans les neutrophiles et les monocytes/macrophages, qui amplifie les réponses inflammatoires de l’immunité innée. Par son association avec l’adaptateur TYROBP/DAP12, la signalisation de TREM-1 active des voies dépendantes de SYK, qui convergent vers les programmes transcriptionnels MAPK et NF-κB, augmentant la production de cytokines et de chimiokines et favorisant l’activation des cellules myéloïdes. TREM-1 est largement étudié dans le contexte des lésions tissulaires induites par l’inflammation et des réponses myéloïdes dérégulées, notamment dans la septicémie, les lésions pulmonaires aiguës, les maladies inflammatoires de l’intestin et l’inflammation associée aux tumeurs. Ces caractéristiques font de **TREM1** une cible utile pour explorer les réseaux de signalisation myéloïde, les interactions inflammatoires (crosstalk) et les sorties transcriptionnelles dépendantes des voies de signalisation.
TREM-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TREM1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TREM1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TREM1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TREM1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.