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TRB-3双切口酶质粒(h) | sc-401746-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRB-3双切口酶质粒(h2) | sc-401746-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIB3 编码 tribbles 假激酶 3(TRB-3),这是一种可被应激诱导的调控蛋白,主要作为支架蛋白调节激酶信号传导,而非直接催化磷酸化反应。TRB-3 通过相互作用影响 AKT 信号、胰岛素通路输出及其下游转录程序,从而参与整合性应激反应与代谢调控,并可影响细胞在存活、凋亡与自噬之间的决策。其表达会对内质网(ER)应激和营养状态作出响应,使其与 PI3K–AKT 通路以及 ATF4/CHOP 相关网络等途径相联系。文献报道 TRIB3 的失调与葡萄糖稳态改变、炎症以及与癌症相关的信号表型有关,因此它是研究应激适应调控线路机制的一个有用节点。
TRB-3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TRIB3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TRIB3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TRIB3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TRIB3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。