TRAF1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423492

Descripción general

Traf1 codifica el factor asociado al receptor del factor de necrosis tumoral 1 (TRAF1), una proteína adaptadora que conecta a miembros de la superfamilia de receptores de TNF con complejos de señalización aguas abajo. En contextos inmunitarios e inflamatorios, TRAF1 modula la señalización canónica y no canónica de NF-κB, influye en las salidas de la vía MAPK y ayuda a determinar decisiones de apoptosis y supervivencia mediante interacciones con proteínas como TRAF2 y las cIAP. Estas actividades contribuyen a la regulación de respuestas de citocinas, la activación de linfocitos y la señalización inmunitaria innata, lo que convierte a Traf1 en un nodo útil para analizar la integración de señales en células inmunitarias. La desregulación de las vías asociadas a TRAF1 se ha implicado en mecanismos de enfermedades inflamatorias y en la señalización del microambiente relevante para la inmuno-oncología, lo que respalda su amplia utilidad en modelos de investigación centrados en vías.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TRAF1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Traf1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Traf1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Traf1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TRAF1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Traf1 para la investigación de la señalización de TRAF1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Traf1 críticos para la función de TRAF1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Traf1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TRAF1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TRAF1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Traf1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TRAF1 (m) y el plásmido HDR TRAF1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Traf1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Traf1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.