Plasmide Double Nickase (h) TRβ: sc-401467-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TRβ correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TRβ Double Nickase (h) et le plasmide TRβ Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant THRB. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TRβ1 Antibody (J51): sc-737
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TRβ | sc-401467-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TRβ | sc-401467-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
THRB code le récepteur β des hormones thyroïdiennes (TRβ), un récepteur nucléaire activé par un ligand qui se lie à la triiodothyronine (T3) et régule la transcription via des éléments de réponse aux hormones thyroïdiennes. TRβ coordonne des programmes contrôlant le métabolisme cellulaire, l’activité mitochondriale, l’homéostasie des lipides et du cholestérol, la thermogenèse et la différenciation, via un dialogue avec l’hétérodimérisation avec RXR et le recrutement de co‑régulateurs. L’activité de THRB s’intègre aux signalisations endocrines et aux réseaux transcriptionnels qui façonnent des états développementaux et métaboliques spécifiques des tissus. La dérégulation de la signalisation THRB ou de la fonction du récepteur est associée à une altération de la sensibilité aux hormones thyroïdiennes et a été étudiée dans des contextes de déséquilibre métabolique et de reprogrammation transcriptionnelle oncogénique.
TRβ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus THRB dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de THRB. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de THRB. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de THRB.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.