Plasmide Double Nickase (h) TOX3: sc-411992-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TOX3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TOX3 Double Nickase (h) et le plasmide TOX3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TOX3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TOX3 | sc-411992-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TOX3 | sc-411992-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TOX3 code un facteur de transcription à domaine HMG (high mobility group) qui se lie à l’ADN et module la structure de la chromatine afin de réguler des programmes d’expression génique liés à la différenciation cellulaire et à la transcription induite par des stimuli. Il est impliqué dans le développement neuronal et la régulation de gènes dépendante de l’activité, et participe à des réseaux transcriptionnels plus larges qui influencent les décisions de destinée cellulaire et les réponses au stress. Des études génétiques et d’expression associent TOX3 à des voies pertinentes pour les maladies, notamment des loci de susceptibilité dans des cancers hormonodépendants et des altérations observées dans des contextes neuropsychiatriques et neurodégénératifs. Ces caractéristiques font de TOX3 une cible utile pour disséquer les mécanismes de contrôle transcriptionnel et les réseaux de gènes en aval dans des modèles cellulaires humains.
TOX3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TOX3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TOX3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TOX3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TOX3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.