TNP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423463

Descripción general

Tnp1 codifica la proteína de transición 1 (TNP1), una proteína nuclear básica expresada durante las fases tardías de la espermatogénesis que reemplaza a las histonas en las espermátides en elongación antes del depósito de protaminas. TNP1 favorece la condensación de la cromatina y el empaquetamiento del genoma durante la espermiogénesis, contribuyendo a la correcta conformación del núcleo y a la maduración del espermatozoide. La alteración de Tnp1 perturba la transición de histonas a protaminas y puede dar lugar a una estructura anómala de la cromatina espermática y a fenotipos de fertilidad masculina reducida en modelos de ratón. Como regulador de la cromatina restringido a células germinales, TNP1 se estudia ampliamente en vías que gobiernan la reprogramación epigenética, la compactación del ADN y la biología reproductiva.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TNP1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tnp1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tnp1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tnp1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TNP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tnp1 para la investigación de la señalización de TNP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Tnp1 críticos para la función de TNP1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tnp1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TNP1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TNP1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tnp1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TNP1 (m) y el plásmido HDR TNP1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tnp1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tnp1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.