TNFα-IP 2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423435

Descripción general

Tnfaip2 codifica la proteína 2 inducida por TNFα (TNFα-IP 2), un factor sensible a citocinas implicado en la señalización inflamatoria y en la remodelación del comportamiento celular durante la activación inmunitaria. Su expresión se induce aguas abajo de las vías de TNFα/NF-κB y relacionadas, y se ha vinculado a la regulación de la dinámica del citoesqueleto, el tráfico de membrana y la migración en contextos mieloides y endoteliales. En sistemas murinos, TNFα-IP 2 se utiliza con frecuencia como lectura de programas transcripcionales proinflamatorios y como un nodo que conecta señales de la inmunidad innata con cambios en la adhesión y la motilidad. La señalización asociada a TNFα-IP 2 desregulada se ha estudiado en el contexto de la inflamación crónica y de la biología del microambiente asociado a tumores, lo que respalda su utilidad para analizar la interacción inflamación–cáncer sin implicar resultados clínicos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TNFα-IP 2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tnfaip2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tnfaip2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tnfaip2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TNFα-IP 2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tnfaip2 para la investigación de la señalización de TNFα-IP 2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Tnfaip2 críticos para la función de TNFα-IP 2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tnfaip2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TNFα-IP 2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TNFα-IP 2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tnfaip2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TNFα-IP 2 (m) y el plásmido HDR TNFα-IP 2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tnfaip2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tnfaip2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.