Plásmido Doble Nickase (h) TMPRSS11A: sc-415530-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TMPRSS11A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TMPRSS11A (h) y el plásmido de doble nickasa TMPRSS11A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TMPRSS11A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TMPRSS11A | sc-415530-NIC | 20 µg | $410.00 |
TMPRSS11A codifica una proteasa de serina transmembrana de tipo II expresada en superficies epiteliales, donde contribuye a la proteólisis pericelular y al remodelado del entorno extracelular dependiente de proteasas. Mediante el clivaje regulado de sustratos proteicos en la membrana celular, TMPRSS11A puede influir en la homeostasis de la barrera epitelial, los programas de diferenciación y las cascadas de señalización inflamatoria vinculadas a las respuestas mucosas. Se han descrito alteraciones en la expresión de TMPRSS11A en epitelios de las vías respiratorias y del tracto gastrointestinal, y se ha estudiado en el contexto de estados de estrés epitelial y de redes de proteasas asociadas a tumores. Estas propiedades hacen de TMPRSS11A una diana útil para investigar la función de proteasas ancladas a membrana, la señalización proteolítica y la biología epitelial.
TMPRSS11A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TMPRSS11A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TMPRSS11A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TMPRSS11A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TMPRSS11A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.