TMPRSS11A Plasmide Double Nickase (h): sc-415530-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TMPRSS11A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TMPRSS11A Double Nickase Plasmid (h) e il TMPRSS11A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TMPRSS11A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TMPRSS11A Plasmide Double Nickase (h) | sc-415530-NIC | 20 µg | $410.00 |
TMPRSS11A codifica una proteasi serinica transmembrana di tipo II espressa sulle superfici epiteliali, dove contribuisce alla proteolisi pericellulare e al rimodellamento dell’ambiente extracellulare dipendente da proteasi. Attraverso la scissione regolata di substrati proteici a livello della membrana cellulare, TMPRSS11A può influenzare l’omeostasi della barriera epiteliale, i programmi di differenziamento e le cascate di segnalazione infiammatoria legate alle risposte mucosali. Un’alterata espressione di TMPRSS11A è stata riportata negli epiteli delle vie aeree e gastrointestinali ed è stata studiata nel contesto di stati di stress epiteliale e di reti di proteasi associate ai tumori. Queste caratteristiche rendono TMPRSS11A un bersaglio utile per indagare la funzione delle proteasi ancorate alla membrana, la segnalazione proteolitica e la biologia epiteliale.
TMPRSS11A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TMPRSS11A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TMPRSS11A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TMPRSS11A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TMPRSS11A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.