TLX2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423424
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TLX2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TLX2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TLX2 Anticuerpo (D-12): sc-514077
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TLX2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423424 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Tlx2 codifica el factor de transcripción homeobox TLX2 (también conocido como HOX11L1), un regulador nuclear implicado en la especificación del linaje neuronal y la maduración durante el desarrollo. TLX2 influye en programas de expresión génica que coordinan la diferenciación, la migración y la conectividad dentro de los sistemas nervioso periférico y central, interactuando con redes de desarrollo más amplias controladas por genes homeobox. En modelos de ratón, la actividad alterada de TLX2 se ha asociado con anomalías en la formación del sistema nervioso entérico y en el desarrollo de neuronas autónomas, lo que lo vincula a vías que regulan la motilidad intestinal y fenotipos del neurodesarrollo. Estas características hacen de TLX2 un nodo útil para estudiar el control transcripcional del desarrollo neural y los circuitos efectores posteriores.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TLX2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tlx2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tlx2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tlx2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TLX2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tlx2 para la investigación de la señalización de TLX2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Tlx2 críticos para la función de TLX2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tlx2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TLX2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TLX2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tlx2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TLX2 (m) y el plásmido HDR TLX2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tlx2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tlx2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.