TLR4 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400068-LAC

Humanes TLR4 (Toll-like Rezeptor 4) ist ein Mustererkennungsrezeptor, der Lipopolysaccharid sowie verwandte mikrobielle oder schädigungsassoziierte Liganden erkennt, um die angeborene Immunantwort zu initiieren. Nach Aktivierung schaltet TLR4 MYD88- und TRIF-abhängige Signalwege an und treibt dadurch NF-κB-, MAPK- und IRF3-Programme, die proinflammatorische Zytokine und Typ‑I‑Interferonantworten regulieren. Die TLR4-Signalgebung beeinflusst die Aktivierung myeloider Zellen, die Antigenpräsentation und den entzündlichen Grundtonus von Geweben und verbindet damit Wirtsabwehr mit fehlregulierter Entzündung. Veränderte TLR4-Aktivität und nachgeschaltete transkriptionelle Outputs werden häufig in der Sepsisforschung, bei Mechanismen chronisch-entzündlicher Erkrankungen, bei metabolischer Entzündung sowie in der Forschung zur Tumor‑Immun‑Mikroumgebung untersucht.

TLR4 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TLR4-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TLR4 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TLR4-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TLR4-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TLR4-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.