Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) TLR4: sc-423419-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) TLR4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TLR4 Double Nickase (m) et le plasmide TLR4 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Tlr4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TLR4 Antibody (25): sc-293072
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) TLR4 | sc-423419-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Tlr4** code le récepteur de type Toll 4 (TLR4), un récepteur de reconnaissance des motifs qui détecte le lipopolysaccharide et d’autres ligands associés aux dommages afin d’initier la signalisation de l’immunité innée. Après activation, TLR4 engage des voies dépendantes de MyD88 et de TRIF, activant les programmes transcriptionnels de NF-κB et d’IRF3 qui régulent les cytokines pro-inflammatoires, les réponses d’interféron de type I et les signaux de costimulation. La signalisation de TLR4 influence l’activation des macrophages et des cellules dendritiques, la sécrétion de cytokines et le recrutement des leucocytes, reliant la détection des agents pathogènes à l’inflammation tissulaire. Une activité dérégulée de TLR4 est largement étudiée dans des modèles d’inflammation de type septicémique, d’inflammation métabolique, d’athérosclérose et de processus neuro-inflammatoires.
TLR4 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Tlr4 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Tlr4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Tlr4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Tlr4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.