Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO TLR1 (m2): sc-423418-KO-2
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- TLR1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m2) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique TLR1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TLR1 Antibody (H-8): sc-514399
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO TLR1 (m2) | sc-423418-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Tlr1 code le récepteur Toll‑like 1 (TLR1) de la souris, un récepteur de reconnaissance des motifs (PRR) qui forme un hétérodimère fonctionnel avec TLR2 afin de détecter, à la surface cellulaire, des lipopeptides bactériens triacylés. La liaison du ligand déclenche une signalisation dépendante de MyD88 et l’activation des cascades NF‑κB et MAPK, favorisant la transcription de cytokines et chimiokines pro‑inflammatoires qui façonnent l’immunité innée ainsi que les réponses immunitaires adaptatives en aval. L’activité de TLR1 influence l’activation des cellules dendritiques et des macrophages, l’immunité de barrière et les interactions avec les produits microbiens au sein du microbiome. Une signalisation TLR1/TLR2 dérégulée a été associée à des phénotypes inflammatoires et à une défense de l’hôte altérée dans des modèles d’infection et de maladies à médiation immunitaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TLR1 (m2) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Tlr1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Tlr1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Tlr1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TLR1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Tlr1 pour l'étude de la signalisation de TLR1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Tlr1 essentiels à la fonction de TLR1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Tlr1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le TLR1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le TLR1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Tlr1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le TLR1 plasmide HDR (m) et le TLR1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Tlr1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Tlr1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.