Plásmido Doble Nickase (h) TFIIIC90: sc-411269-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TFIIIC90 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TFIIIC90 (h) y el plásmido de doble nickasa TFIIIC90 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GTF3C4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TFIIIC90 | sc-411269-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TFIIIC90 | sc-411269-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **GTF3C4** codifica **TFIIIC90**, una subunidad central del complejo **TFIIIC** que reconoce elementos promotores internos en genes transcritos por la **ARN polimerasa III**, incluidos los **ARNt** y otros pequeños ARN no codificantes. Al favorecer el ensamblaje de la maquinaria de preiniciación de la Pol III e influir en la organización de la cromatina en los loci de Pol III, TFIIIC90 contribuye a la homeostasis de los ARN pequeños, a la capacidad de traducción y a una coordinación más amplia de las redes transcripcionales. La regulación dependiente de TFIIIC se interseca con el control del crecimiento celular, las respuestas al estrés y la arquitectura del genoma a través de sus funciones en elementos repetitivos y de tipo barrera/aislante en determinados contextos genómicos. La desregulación de los programas transcripcionales de la Pol III y de componentes de TFIIIC se ha asociado con fenotipos proliferativos y un metabolismo del ARN alterado, lo que convierte a TFIIIC90 en un objetivo útil para estudios mecanísticos en vías relevantes para el cáncer y la ribostasis.
TFIIIC90 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GTF3C4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GTF3C4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GTF3C4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GTF3C4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.