Plasmide Double Nickase (h) TFE3: sc-401179-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TFE3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TFE3 Double Nickase (h) et le plasmide TFE3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TFE3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TFE3 | sc-401179-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TFE3 | sc-401179-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TFE3 (transcription factor binding to IGHM enhancer 3) est un facteur de transcription bHLH-Zip de la famille MiT/TFE qui régule des programmes contrôlant la biogenèse des lysosomes, l’autophagie et le métabolisme cellulaire. Il intègre des signaux issus des voies de détection des nutriments, notamment via une régulation dépendante de mTORC1 de sa localisation subcellulaire, afin de coordonner les réponses transcriptionnelles au stress et à la privation de nutriments. Dans le noyau, TFE3 peut induire l’expression de gènes impliqués dans la fonction lysosomale et le flux catabolique, modulant des processus tels que le trafic endolysosomal et l’homéostasie mitochondriale. Une activité dérégulée de TFE3 est impliquée dans des contextes pathologiques, notamment des fusions du gène TFE3 dans le carcinome rénal à cellules claires, ainsi qu’une altération du contrôle transcriptionnel de la protéostase et de la signalisation inflammatoire.
TFE3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TFE3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TFE3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TFE3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TFE3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.