Plasmide Double Nickase (h) TBX4: sc-405242-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TBX4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TBX4 Double Nickase (h) et le plasmide TBX4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TBX4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TBX4 Antibody (G-4): sc-515196
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TBX4 | sc-405242-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TBX4 | sc-405242-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TBX4 code un facteur de transcription de la famille T-box, qui se lie à l’ADN via un domaine T-box conservé afin de réguler des programmes d’expression génique contrôlant la différenciation mésenchymateuse embryonnaire, la mise en place des membres et l’organogenèse. Au cours du développement humain, l’activité de TBX4 s’intègre aux réseaux de signalisation WNT, BMP et FGF pour coordonner la spécification des progéniteurs et la morphogenèse des tissus. Une fonction dérégulée de TBX4 est impliquée dans des phénotypes congénitaux du développement, notamment des malformations des membres et des atteintes vasculaires pulmonaires, ce qui en fait une cible pertinente pour étudier le contrôle transcriptionnel des voies du développement. En tant que régulateur nucléaire, TBX4 constitue un nœud accessible pour explorer la logique enhancer–promoteur, les décisions de lignée et les circuits transcriptionnels en aval dans des modèles cellulaires pertinents.
TBX4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TBX4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TBX4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TBX4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TBX4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.