TBL1XR1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-401998

Übersicht

TBL1XR1 (transducin-β-ähnlicher 1, X‑chromosomaler Rezeptor 1) kodiert einen Coregulator mit WD40‑Repeats, der in NCoR/SMRT-Transkriptionsrepressionskomplexen wirkt und am dynamischen Wechsel zwischen Repression und Aktivierung an Promotor- und Enhancer-Regionen beteiligt ist. Es verknüpft die chromatinassoziierte regulatorische Maschinerie mit signalabhängigen Transkriptionsprogrammen, darunter Signalwege stromabwärts von nukleären Rezeptoren sowie der Wnt/β‑Catenin-Signalweg, und beeinflusst damit Zellschicksalsentscheidungen, Proliferation und Differenzierung. Über seine Funktionen in der Transkriptionskontrolle und der Rekrutierung von Kofaktoren wurde TBL1XR1 mit onkogenen Transkriptionszuständen sowie mit neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen in Verbindung gebracht, die in genetischen Studien beschrieben wurden. Eine Störung von TBL1XR1 kann daher genutzt werden, um chromatinabhängige Genregulation, die Stabilität transkriptioneller Netzwerke und das Zusammenspiel von Signalwegen (Cross-talk) in humanen Zellmodellen zu untersuchen.

Das TBL1XR1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TBL1XR1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TBL1XR1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TBL1XR1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TBL1XR1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TBL1XR1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TBL1XR1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TBL1XR1-Exone abzielen, die für die TBL1XR1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TBL1XR1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TBL1XR1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TBL1XR1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TBL1XR1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TBL1XR1 HDR-Plasmid (h) und TBL1XR1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TBL1XR1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TBL1XR1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.