TAUT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402918

Visão geral

SLC6A6 codifica o transportador de taurina TAUT, um transportador de membrana dependente de sódio e cloreto que mantém os reservatórios intracelulares de taurina necessários para a homeostase osmótica, o manejo de cálcio e a citoproteção contra o estresse oxidativo e do retículo endoplasmático (RE). A captação de taurina mediada por TAUT sustenta a função mitocondrial, a estabilização de membranas e processos de sinalização que influenciam a sobrevivência celular, a diferenciação e a regulação do volume em tecidos excitáveis e não excitáveis. Alterações na atividade de SLC6A6 e na disponibilidade de taurina têm sido associadas a maior suscetibilidade ao estresse celular e a disfunções em sistemas como retina, coração, rim e tecido nervoso, tornando-o relevante para estudos de neurobiologia, regulação cardiometabólica e respostas inflamatórias ao estresse. Como parte das redes de transporte de carreadores de solutos, o TAUT se cruza com vias que governam gradientes iônicos, equilíbrio redox e programas gênicos adaptativos ao estresse.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TAUT (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SLC6A6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SLC6A6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SLC6A6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TAUT.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SLC6A6 para a investigação da sinalização de TAUT, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SLC6A6 críticos para a função TAUT
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SLC6A6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TAUT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TAUT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SLC6A6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TAUT Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TAUT (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SLC6A6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SLC6A6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.