Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TARDBP Plasmide Double Nickase (m): sc-433014-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TARDBP Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TARDBP Double Nickase Plasmid (m) e il TARDBP Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Tardbp. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: TARDBP Antibody (E-10): sc-376311
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TARDBP Plasmide Double Nickase (m) | sc-433014-NIC | 20 µg | $410.00 |
Tardbp codifica TARDBP (TDP-43), una proteina legante RNA/DNA prevalentemente nucleare che regola lo splicing del pre-mRNA, la stabilità e il trasporto dell’mRNA, nonché la biogenesi dei microRNA attraverso il riconoscimento di motivi ricchi in UG. TARDBP partecipa alla dinamica dei granuli di RNA e alle risposte allo stress, influenzando l’integrità del trascrittoma e la proteostasi in condizioni di stress cellulare. Nei sistemi murini, Tardbp è ampiamente utilizzato per studiare il metabolismo dell’RNA in neuroni e cellule gliali, il feedback autoregolatorio sul proprio trascritto e il cross-talk con vie che controllano il trasporto nucleo-citoplasmatico e la traduzione. La deregolazione della funzione di TARDBP e la sua mislocalizzazione sono fortemente associate alla neurodegenerazione e ai processi di aggregazione proteica, rendendolo un bersaglio chiave per studi meccanicistici sulla patologia delle proteine leganti l’RNA.
TARDBP Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Tardbp nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Tardbp. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Tardbp. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Tardbp interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.