Plasmide CRISPR/Cas9 KO TAL1 (h2): sc-401101-KO-2

Présentation

TAL1 (protéine 1 de la leucémie aiguë lymphoblastique T) est un facteur de transcription de type hélice-boucle-hélice basique (bHLH) qui régule la spécification des lignages et les programmes de différenciation au cours du développement hématopoïétique, en particulier dans les compartiments érythroïde et des cellules T. Il agit au sein de complexes transcriptionnels multiprotéiques avec des partenaires tels que E2A/TCF3, LMO2, LDB1 et des facteurs GATA, afin de contrôler l’activité des enhancers et l’accessibilité de la chromatine au niveau de gènes gouvernant la prolifération et la maturation. TAL1 intègre des réseaux de signalisation et de transcription qui orientent les décisions de destin des cellules souches/progénitrices hématopoïétiques et maintient des états transcriptionnels dépendants du contexte. Une expression dérégulée de TAL1 ou le détournement d’enhancers est fortement associé à la biologie de la leucémie aiguë lymphoblastique T, ainsi qu’à des perturbations plus larges des circuits transcriptionnels hématopoïétiques.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TAL1 (h2) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène TAL1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du TAL1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert TAL1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TAL1.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en TAL1 pour l'étude de la signalisation de TAL1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de TAL1 essentiels à la fonction de TAL1
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de TAL1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le TAL1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le TAL1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus TAL1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le TAL1 plasmide HDR (h) et le TAL1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie TAL1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles TAL1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.