Tak1慢病毒激活颗粒(m2): sc-424044-LAC-2
- 针对种属：mouse
- 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
- Tak1 慢病毒激活颗粒（m2）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，通过细胞慢病毒转导，特异高效地上调目的基因的表达
- Tak1慢病毒激活颗粒(m2)包含以下SAM激活元素：一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了转录活化域VP64；一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白；一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素，潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
- 一经转导，形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因，招募转录因子
- 由 Tak1 慢病毒激活质粒 (m2) 和 Tak1 慢病毒激活质粒 (m22) 编码的 gRNA 靶向 Map3k7 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因激活效率可以用抗体：Tak1 Antibody (C-9): sc-7967，通过WB、IF或IHC分析
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Tak1慢病毒激活颗粒(m2) | sc-424044-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
小鼠Map3k7基因编码TAK1（TGF-β激活的激酶1），这是一种MAP3K，能够整合来自TGF-β/BMP受体、TNF受体超家族成员、Toll样受体以及IL-1受体复合体的信号，从而激活下游NF-κB与MAPK级联通路（JNK、p38和ERK）。TAK1通过TAB衔接蛋白介导，对MAP2K和IKK复合体进行磷酸化，进而在多种细胞类型中调控炎症与先天免疫信号传导、应激反应、凋亡/存活决策以及组织稳态。TAK1信号失调与异常细胞因子产生、屏障完整性受损以及病理性重塑有关，并在炎症性疾病、自身免疫及肿瘤相关信号网络的模型中被观察到。针对Map3k7的基因编辑可用于机制层面解析受体近端信号事件、通路串扰以及细胞类型特异性表型，例如在小鼠细胞和体内系统中通过基因敲除/敲入、表位标记或对激酶结构域的扰动来实现。
Tak1 慢病毒激活颗粒（m2）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Map3k7 表达。
Tak1 慢病毒激活颗粒（m2）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在Map3k7转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性Tak1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 Map3k7 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。