Plásmido Doble Nickase (h) TAF5L: sc-408861-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TAF5L consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TAF5L (h) y el plásmido de doble nickasa TAF5L (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TAF5L. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TAF5L | sc-408861-NIC | 20 µg | $410.00 |
TAF5L codifica una proteína similar a un factor asociado a TBP que participa en el inicio de la transcripción al contribuir al ensamblaje y la estabilidad de los complejos de preiniciación de la ARN polimerasa II. Como componente asociado a la regulación transcripcional relacionada con TFIID/SAGA, TAF5L ayuda a coordinar el reconocimiento de promotores, el control dependiente de la cromatina de la expresión génica y programas transcripcionales vinculados con la identidad celular y la proliferación. La alteración de la función de TAF5L puede desestabilizar la homeostasis transcripcional global y se ha investigado en el contexto de la desregulación transcripcional observada en el cáncer y otras enfermedades en las que se modifican la arquitectura de los promotores y el equilibrio de coactivadores. Estas características hacen de TAF5L una diana útil para estudios mecanísticos de redes de factores centrales de la transcripción y de la regulación génica acoplada a la cromatina.
TAF5L El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TAF5L en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TAF5L. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TAF5L. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TAF5L alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.