TAF II p135 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404230

Descripción general

TAF4 codifica TAF II p135, una subunidad central del complejo TFIID que coopera con TBP y otros TAF para iniciar la transcripción dependiente de la ARN polimerasa II. A través de interacciones con factores de transcripción específicos de secuencia y reguladores asociados a la cromatina, TAF II p135 contribuye al reconocimiento del promotor, al ensamblaje del complejo de preiniciación y al control de programas de expresión génica dependientes del estado celular. La función de TAF4 está estrechamente vinculada a la remodelación de la cromatina y a redes de coactivadores transcripcionales, lo que la conecta con la regulación de la proliferación, la diferenciación y la transcripción sensible al estrés. La actividad desregulada de TFIID/TAF y el inicio transcripcional alterado se estudian con frecuencia en el contexto de la reprogramación transcripcional oncogénica y otros trastornos de la regulación génica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TAF II p135 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TAF4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TAF4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TAF4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TAF II p135.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TAF4 para la investigación de la señalización de TAF II p135, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TAF4 críticos para la función de TAF II p135
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TAF4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TAF II p135 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TAF II p135 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TAF4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TAF II p135 (h) y el plásmido HDR TAF II p135 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TAF4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TAF4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.