Synaptoporin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-428189

Descripción general

Synpr codifica la sinaptoporina, una proteína de membrana de las vesículas sinápticas enriquecida en las terminales presinápticas de las neuronas de ratón y relacionada con la familia de la sinaptofisina. La sinaptoporina contribuye a la biogénesis y al reciclaje de las vesículas sinápticas, influyendo en la liberación de neurotransmisores y en la plasticidad sináptica a corto plazo mediante el tráfico dependiente de la actividad y el acoplamiento entre endocitosis y exocitosis. Se estudia con frecuencia en el contexto del hipocampo y de los circuitos glutamatérgicos, donde la dinámica vesicular moldea la excitabilidad de la red. La alteración de la composición de proteínas vesiculares presinápticas, incluidas las vías asociadas a la sinaptoporina, es relevante para investigaciones sobre mecanismos de enfermedades del neurodesarrollo y neurodegenerativas, sin implicar resultados clínicos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Synaptoporin (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Synpr en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Synpr junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Synpr tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Synaptoporin.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Synpr para la investigación de la señalización de Synaptoporin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Synpr críticos para la función de Synaptoporin
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Synpr para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Synaptoporin CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Synaptoporin CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Synpr. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Synaptoporin (m) y el plásmido HDR Synaptoporin (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Synpr para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Synpr definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.