Synaptojanin 2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423241

Descripción general

El gen **Synj2** del ratón codifica la **sinaptojanina 2**, una fosfatasa de polifosfoinosítidos que desfosforila **PI(4,5)P2** y otros fosfoinosítidos relacionados para coordinar el tráfico de membranas y la señalización. La sinaptojanina 2 actúa en la endocitosis mediada por clatrina, el reciclaje endosomal y la remodelación del citoesqueleto de actina, influyendo así en la internalización de receptores y en la dinámica de vías dependientes de fosfoinosítidos. A través de la regulación de los reservorios de fosfoinosítidos, impacta procesos celulares como la migración, el crecimiento de neuritas y el recambio de vesículas. La desregulación del metabolismo de fosfoinosítidos y del control endocítico se ha implicado en la neurobiología y en adaptaciones de señalización asociadas al cáncer, lo que convierte a **Synj2** en un objetivo útil para estudios mecanísticos de la homeostasis de membranas y de la señalización.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Synaptojanin 2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Synj2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Synj2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Synj2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Synaptojanin 2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Synj2 para la investigación de la señalización de Synaptojanin 2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Synj2 críticos para la función de Synaptojanin 2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Synj2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Synaptojanin 2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Synaptojanin 2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Synj2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Synaptojanin 2 (m) y el plásmido HDR Synaptojanin 2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Synj2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Synj2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.