Synaptogyrin-3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423240

Descripción general

Syngr3 codifica la sinaptogirina-3, una proteína de membrana de las vesículas sinápticas con cuatro dominios transmembrana, enriquecida en terminales presinápticos, que contribuye al tráfico de vesículas y a la dinámica de liberación de neurotransmisores. La sinaptogirina-3 participa en procesos de exocitosis regulada y de reciclaje endocítico que modulan la transmisión y la plasticidad sinápticas, interactuando con la maquinaria central del ciclo de las vesículas sinápticas. La alteración de la función de la familia sinaptogirina se ha relacionado con perturbaciones de la actividad de redes neuronales y de la homeostasis sináptica, lo que hace que Syngr3 sea relevante para estudios de mecanismos del neurodesarrollo y de la neurodegeneración. En modelos murinos, la perturbación de Syngr3 resulta útil para diseccionar las contribuciones presinápticas a fenotipos a nivel de circuito y a la señalización dependiente de la actividad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Synaptogyrin-3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Syngr3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Syngr3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Syngr3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Synaptogyrin-3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Syngr3 para la investigación de la señalización de Synaptogyrin-3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Syngr3 críticos para la función de Synaptogyrin-3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Syngr3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Synaptogyrin-3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Synaptogyrin-3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Syngr3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Synaptogyrin-3 (m) y el plásmido HDR Synaptogyrin-3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Syngr3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Syngr3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.