Synaptogyrin-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423239

Descripción general

Syngr2 codifica la sinaptogirina-2, una proteína tetraspán de la membrana de las vesículas sinápticas, enriquecida en terminales presinápticas, donde contribuye a la organización de las vesículas y a la dinámica de liberación de neurotransmisores. La sinaptogirina-2 participa en el ciclo de las vesículas sinápticas, influyendo en el acoplamiento exocitosis/endocitosis y en el tráfico vesicular dentro de células neuronales y neuroendocrinas. A través de su papel en la regulación de la disponibilidad de vesículas y de la probabilidad de liberación, los mecanismos relacionados con SYNG2 son relevantes para estudios de plasticidad sináptica y funcionamiento de circuitos. La alteración del manejo presináptico de vesículas es una característica recurrente en modelos de trastornos del neurodesarrollo y neurodegenerativos, lo que convierte a Syngr2 en un objetivo útil para el análisis mecanístico de la disfunción sináptica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Synaptogyrin-2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Syngr2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Syngr2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Syngr2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Synaptogyrin-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Syngr2 para la investigación de la señalización de Synaptogyrin-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Syngr2 críticos para la función de Synaptogyrin-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Syngr2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Synaptogyrin-2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Synaptogyrin-2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Syngr2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Synaptogyrin-2 (m) y el plásmido HDR Synaptogyrin-2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Syngr2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Syngr2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.