Syk Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400189-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SykO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Syk (h) e o Plasmídeo Double Nickase Syk (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SYK. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Syk Anticorpo (4D10): sc-1240
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Syk Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400189-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Syk Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400189-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SYK codifica a Syk, uma tirosina quinase citosólica não receptora que conecta a sinalização de imunorreceptores a vias efetoras a jusante em células hematopoéticas. Após o engajamento de receptores que contêm ITAM, como o receptor de célula B e os receptores Fc, a Syk fosforila proteínas adaptadoras e enzimas para propagar a sinalização por meio de PLCγ, PI3K–AKT, MAPK/ERK e NF-κB, modulando o fluxo de cálcio, programas transcricionais, proliferação e respostas de citocinas. Além da ativação imune, a Syk contribui para a fagocitose mediada por FcR, para contextos de sinalização relacionados ao inflamassoma e para a remodelação do citoesqueleto via vias associadas a integrinas. A desregulação da sinalização de SYK tem sido implicada em ativação aberrante de células B e em circuitos inflamatórios, o que a torna um foco frequente em estudos de redes de sinalização imune e mecanismos de doenças hematológicas.
Syk O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SYK em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SYK. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SYK. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SYK interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.