Plásmido Doble Nickase (h) SUV420H1: sc-404615-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SUV420H1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SUV420H1 (h) y el plásmido de doble nickasa SUV420H1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a KMT5B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SUV420H1 | sc-404615-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SUV420H1 | sc-404615-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KMT5B codifica la metiltransferasa humana de lisina en histonas SUV420H1, una enzima que cataliza la di- y trimetilación de H4K20 y contribuye al establecimiento de estados de cromatina represivos. Al modular la arquitectura de la cromatina de orden superior y la memoria epigenética, SUV420H1 influye en el momento de la replicación del ADN, la estabilidad del genoma y la reparación del daño en el ADN, conectándose con el control del ciclo celular y las vías de remodelación de la cromatina. Los patrones alterados de metilación de H4K20 y la actividad desregulada de SUV420H1 se han vinculado con programas transcripcionales aberrantes y con la inestabilidad genómica observada en múltiples contextos patológicos, incluidos el cáncer y los trastornos del neurodesarrollo. Estas propiedades hacen de KMT5B un objetivo útil para estudiar la regulación de la expresión génica dependiente de la cromatina y el mantenimiento de la integridad del epigenoma en células humanas.
SUV420H1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus KMT5B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de KMT5B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de KMT5B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con KMT5B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.