Particules Lentivirales d'Activation (h) survivin: sc-400205-LAC

Le gène humain **BIRC5** code la survivine, une protéine bifonctionnelle de la famille des inhibiteurs de l’apoptose (IAP) qui coordonne la progression de la mitose et la survie cellulaire. La survivine est un composant central du complexe passager chromosomique, où elle soutient l’attachement kinétochore–microtubule, le contrôle du point de contrôle du fuseau (spindle checkpoint) et la cytocinèse, tout en modulant la signalisation apoptotique dépendante des caspases. L’expression de **BIRC5** est étroitement liée à la régulation du cycle cellulaire et aux réponses au stress, des niveaux élevés étant fréquemment associés à des états prolifératifs et à une apoptose dérégulée en biologie du cancer. En tant que régulateur nodal reliant les voies de la mitose et de la survie, la survivine est largement étudiée dans les mécanismes d’instabilité génomique, les phénotypes de réponse aux thérapies et les analyses de voies fondées sur des biomarqueurs.

Les particules d'activation lentivirales survivin (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de BIRC5 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales survivin (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription BIRC5, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de survivin. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif BIRC5 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.