Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Stat5b Double Nickase Plasmid (m): sc-423179-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Stat5b Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Stat5b Double-Nickase-Plasmid (m) und Stat5b Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Stat5b abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Stat5b: sc-1656
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Stat5b Double Nickase Plasmid (m) | sc-423179-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Stat5b Double Nickase Plasmid (m2) | sc-423179-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Maus-Stat5b (Signal Transducer and Activator of Transcription 5B) ist ein zytokinresponsiver Transkriptionsfaktor, der rezeptorassoziierte JAK-Kinasen mit raschen Veränderungen der Genexpression koppelt. Nach der Phosphorylierung dimerisiert STAT5B und transloziert in den Zellkern, um Programme zu regulieren, die die Lymphozytenentwicklung, die myeloische Differenzierung, den Stoffwechsel und die Wachstumsfaktor-Signalgebung steuern; besonders ausgeprägt sind seine Funktionen nachgeschaltet von Zytokinen der IL‑2-Familie und vom Wachstumshormon. Die Stat5b-Aktivität greift in Rückkopplungsschaltkreise des JAK‑STAT-Signalwegs, in Chromatin-Remodeling sowie in die transkriptionelle Kontrolle von Überlebens- und Zellzyklusgenen ein. Eine dysregulierte STAT5B-Signalgebung wird häufig in Modellen von Immunungleichgewicht, Entzündung und hämatopoetischer Transformation untersucht, bei denen veränderte transkriptionelle Outputs die Linienfestlegung und die proliferative Kapazität verschieben können.
Stat5b Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Stat5b-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Stat5b abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Stat5b-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Stat5b-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.