Plasmide CRISPR/Cas9 KO Sox-7 (h): sc-402935

Présentation

SOX7 code le facteur de transcription humain Sox-7, membre de la famille SOX, qui se lie à l’ADN via une boîte HMG afin de réguler des programmes d’expression génique contrôlant les décisions de destinée cellulaire. Sox-7 est impliqué dans le développement vasculaire et endodermique et influence la différenciation endothéliale, la migration et des réseaux transcriptionnels liés à la fonction de barrière, notamment via un dialogue avec les voies de signalisation Wnt/β-caténine et Notch. Une expression altérée de SOX7 a été rapportée dans de multiples contextes tumoraux et est associée à des modifications des voies liées à la prolifération, à l’invasion et à la transition épithélio-mésenchymateuse. Parce que Sox-7 intègre des signaux développementaux et de spécification de lignée, il est fréquemment étudié dans des modèles d’angiogenèse, de différenciation des cellules souches et de biologie du cancer.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Sox-7 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SOX7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SOX7, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SOX7 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Sox-7.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SOX7 pour l'étude de la signalisation de Sox-7, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de SOX7 essentiels à la fonction de Sox-7
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SOX7 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Sox-7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Sox-7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SOX7. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Sox-7 plasmide HDR (h) et le Sox-7 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SOX7 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SOX7 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.