SNX5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404660

Descripción general

El SNX5 humano (sorting nexin 5) codifica una proteína endosomal que contiene un dominio PX, se une a fosfoinosítidos y coopera con factores de remodelación de membrana para regular la clasificación de cargas y el tráfico vesicular. SNX5 participa en las rutas de transporte de endosoma a Golgi y de reciclaje endosomal, favoreciendo el recambio de receptores y la atenuación de señales al controlar la localización subcelular de proteínas transmembrana. A través de sus funciones en la tubulación endosomal y el ensamblaje de complejos proteicos, SNX5 influye en procesos de homeostasis celular vinculados a la señalización mediada por receptores, la captación de nutrientes y la composición de membranas. Las alteraciones en las vías de tráfico endosomal que involucran a las sorting nexins se asocian con una señalización de factores de crecimiento desregulada y respuestas de estrés celular, lo que hace a SNX5 relevante para estudios mecanísticos de defectos de tráfico asociados a enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SNX5 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SNX5 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SNX5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SNX5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SNX5.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SNX5 para la investigación de la señalización de SNX5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SNX5 críticos para la función de SNX5
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SNX5 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SNX5 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SNX5 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SNX5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SNX5 (h) y el plásmido HDR SNX5 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SNX5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SNX5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.