Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Smo Antibody (E-5) Alexa Fluor® 647: sc-166685 AF647. Direct fluorescent western blot analysis of Smo expression in K-562 whole cell lysate. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Cruz Marker™ Molecular Weight Standards detected with Cruz Marker™ MW Tag-Alexa Fluor® 488: sc-516790.
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SMO/Smoothened双切口酶质粒(h): sc-400491-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SMO/Smoothened 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- SMO/Smoothened双切酶质粒（h）和SMO/Smoothened双切酶质粒（h2）编码针对SMO的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：SMO/Smoothened: sc-166685，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SMO/Smoothened双切口酶质粒(h) | sc-400491-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SMO/Smoothened双切口酶质粒(h2) | sc-400491-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SMO（Smoothened）是一种七次跨膜信号转导蛋白，在 Hedgehog 通路中位于 PTCH1 下游，通过调控 GLI 依赖的转录程序，控制胚胎模式形成、干细胞与祖细胞维持以及组织稳态。在缺乏 Hedgehog 配体时，PTCH1 会抑制 SMO 活性；当配体结合后，这种抑制被解除，使 SMO 得以在初级纤毛中富集并从该处发出信号。SMO 信号失调会扰乱发育相关基因的表达，并在多种疾病背景下与致癌性通路激活及异常细胞命运决定相关。因此，人源 SMO 被广泛用于通路图谱绘制、纤毛信号生物学研究以及转录网络调控机制的解析。
SMO/Smoothened 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 SMO 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SMO内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏SMO的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了SMO基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。