Plasmide Double Nickase (h) Slfn5: sc-408333-NIC

La SLFN5 humaine (Slfn5) est une protéine de la famille Schlafen induite par l’interféron, impliquée dans la régulation de programmes transcriptionnels liés à l’immunité innée, au contrôle du cycle cellulaire et à la différenciation cellulaire. Il a été rapporté que Slfn5 module l’expression génique en aval de la signalisation interféron/JAK–STAT et qu’elle influence des réseaux de réponse inflammatoire et antivirale, notamment via des effets sur la régulation transcriptionnelle associée à la chromatine. Une expression altérée de SLFN5 a été associée à des changements de prolifération et de migration des cellules tumorales, ainsi qu’à des signatures géniques liées à l’immunité dans de multiples contextes cancéreux, ce qui étaye son intérêt en tant que nœud mécanistique dans l’étude des signalisations oncogéniques et inflammatoires. Ces propriétés font de SLFN5 une cible pertinente pour disséquer les voies induites par l’interféron, la régulation transcriptionnelle et des phénotypes dépendant du contexte dans des modèles de cellules humaines.

Slfn5 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLFN5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLFN5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLFN5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLFN5.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.