Plasmide CRISPR/Cas9 KO SLC6A15 (h): sc-410592

Présentation

SLC6A15 code un transporteur d’acides aminés neutres dépendant du sodium, appartenant à la famille SLC6, qui assure l’absorption cellulaire des acides aminés à chaîne ramifiée ainsi que d’autres acides aminés neutres, contribuant à l’homéostasie des acides aminés et au métabolisme lié aux neurotransmetteurs. Il est enrichi dans les tissus nerveux et soutient des processus tels que la détection des nutriments, la fonction synaptique et le couplage métabolique via des voies liées à la disponibilité en acides aminés et aux réponses cellulaires au stress. Des variations ou une expression altérée de SLC6A15 ont été associées, dans des études de recherche, à des phénotypes neuropsychiatriques et à la biologie du stress, reflétant son rôle dans la résilience métabolique neuronale. En tant que transporteur membranaire, SLC6A15 constitue également un point d’entrée pertinent pour étudier la régulation des transporteurs, leur trafic intracellulaire et la signalisation dépendante des substrats dans des modèles cellulaires humains.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO SLC6A15 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SLC6A15 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SLC6A15, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SLC6A15 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine SLC6A15.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SLC6A15 pour l'étude de la signalisation de SLC6A15, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de SLC6A15 essentiels à la fonction de SLC6A15
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SLC6A15 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le SLC6A15 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le SLC6A15 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SLC6A15. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le SLC6A15 plasmide HDR (h) et le SLC6A15 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SLC6A15 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SLC6A15 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.