SIRT2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400590-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SIRT2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SIRT2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase SIRT2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SIRT2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SIRT2 Anticorpo (A-5): sc-28298
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SIRT2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400590-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SIRT2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400590-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SIRT2 codifica uma desacetilase dependente de NAD⁺ que se localiza predominantemente no citoplasma e modula estados de acetilação de proteínas que governam a dinâmica dos microtúbulos, a progressão do ciclo celular e as respostas celulares ao estresse. Ao desacetilar substratos como a α-tubulina e reguladores metabólicos, a SIRT2 ajuda a coordenar o remodelamento do citoesqueleto, a fidelidade mitótica e a adaptação metabólica, ligando sua atividade a vias influenciadas pela disponibilidade de NAD⁺ e pelo equilíbrio redox. Alterações na função de SIRT2 têm sido investigadas no contexto de neurodegeneração, inflamação e fenótipos relacionados ao câncer, nos quais mudanças na sinalização dependente de acetilação podem afetar a diferenciação, a sobrevivência e a estabilidade genômica. Como membro da família das sirtuínas, a SIRT2 é frequentemente estudada por seu papel em integrar a detecção de nutrientes com o controle epigenético e pós-traducional de programas celulares.
SIRT2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SIRT2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SIRT2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SIRT2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SIRT2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.